Etablerings-, föröknings- och rotmedium förklarat
Vävnadskultur utförs sällan i ett och samma medium från början till slut. Istället går kulturerna ofta igenom flera stadier, där varje stadium har ett annat biologiskt mål.
Tre av de viktigaste är etablering, förökning och rotbildning. Genom att förstå dessa stadier blir vävnadskulturen mycket lättare att hantera.
Stadium 1: Etablering
Etableringen börjar när den ursprungliga explanten förs in i en steril kultur.
I detta skede är de primära målen enkla:
- hålla vävnaden vid liv
- få en kontamineringsfri kultur
- främja stabil tillväxt
- låta explanten återhämta sig från steriliseringen
Färska explanter har ofta utsatts för betydande stress. Blad kan ha avlägsnats, vävnad har skurits och växten har genomgått kemisk ytsterilisering. Av den anledningen är etableringen inte nödvändigtvis tiden att maximera skottförökningen. En lyckad etableringskultur är helt enkelt en som förblir ren och börjar producera frisk ny tillväxt.
Stadium 2: Förökning
När en kultur är stabil ändras målet. Istället för att underhålla ett skott vill odlaren producera flera. Förökningstmedia innehåller ofta en starkare cytokininpåverkan. Cytokininer uppmuntrar befintliga knoppar att aktiveras och kan främja utvecklingen av ytterligare skott. När tillräckligt många skott har utvecklats kan kulturen delas och överföras till färskt förökningmedium. Denna process kallas subkulturering. Upprepad subkulturering kan förvandla en lyckad explant till många enskilda plantor.
När bör kulturer subkultureras?
Kulturer bör inte förbli obegränsat länge i samma medium.
Med tiden:
- förbrukas näringsämnen
- sockret sinar
- agaret kan torka ut
- avfallsprodukter ansamlas
- exponeringen för tillväxthormoner fortsätter
Det ideala intervallet beror på arten och tillväxttakten. Istället för att enbart följa kalendern, observera växterna. Friska, aktivt växande skott är generellt bättre lämpade för subkulturering än svag eller stressad vävnad.
Stadium 3: Rotbildning
Ett skott som producerats under förökningen är inte automatiskt redo att lämna vävnadskulturen. Det behöver vanligtvis ett fungerande rotsystem. Under rotbildningen ändras hormonbalansen för att främja rotinitiering och rotförlängning. Auxiner som IBA används ofta i detta syfte. Målet är inte längre att skapa så många skott som möjligt. Istället är målet att producera en stark, enskild planta som är kapabel att överleva utanför kulturkärlet.
Varför använda ett medium till allt?
Ett medium som ger utmärkt förökning kan hämma rotbildningen. Ett medium som är optimerat för rotbildning kan ge mycket lite skottförökning. Växtens utveckling förändras beroende på näringskoncentration, sockerkoncentration och hormonbalans. Genom att använda separata stadier kan odlaren kontrollera dessa utvecklingssignaler.
Ett användbart sätt att tänka kring systemet är:
Etablering → Överleva och hålla sig ren
Förökning → Producera fler skott
Rotbildning → Bygg en självständig planta
Akklimatisering → Anpassa sig till normala odlingsförhållanden
Denna ordningsföljd är en av de grundläggande idéerna bakom mikroverodling.
