Etablerings-, föröknings- och rotmedium förklarat
Vävnadsodling av växter utförs sällan på ett och samma medium från början till slut. Istället genomgår odlingarna ofta flera stadier, där varje stadium har ett specifikt biologiskt mål.
Tre av de viktigaste är etablering, multiplikation och rotning. Att förstå dessa stadier gör vävnadsodling mycket lättare att hantera.
Stadie 1: Etablering
Etableringen påbörjas när det ursprungliga explantatet introduceras i en steril kultur.
I detta skede är de primära målen enkla:
- hålla vävnaden vid liv
- erhålla en kontaminationsfri kultur
- uppmuntra stabil tillväxt
- låta explantatet återhämta sig från steriliseringen
Färska explantat har ofta utsatts för avsevärd stress. Blad kan ha tagits bort, vävnad har skurits och växten har genomgått kemisk ytsterilisering. Av denna anledning är etableringen inte nödvändigtvis rätt tidpunkt för att maximera skottmultiplikation. En lyckad etableringskultur är helt enkelt en kultur som förblir ren och börjar producera ny, frisk tillväxt.
Stadie 2: Multiplikation
När en kultur är stabil ändras målet. Istället för att behålla ett skott vill odlaren producera flera. Multiplikationsmedier innehåller ofta en starkare påverkan av cytokininer. Cytokininer uppmuntrar befintliga knoppar att aktiveras och kan främja utvecklingen av ytterligare skott. När tillräckligt många skott har utvecklats kan kulturen delas och överföras till ett nytt multiplikationsmedium. Denna process kallas subkultivering. Upprepad subkultivering kan förvandla ett lyckat explantat till många enskilda småplantor.
När bör kulturer subkultiveras?
Kulturer bör inte stanna på samma medium under obestämd tid.
Med tiden:
- förbrukas näringsämnen
- tar sockret slut
- kan agaret torka ut
- ansamlas restprodukter
- fortsätter exponeringen för växthormoner (PGR)
Det ideala intervallet beror på arten och tillväxttakten. Istället för att bara följa kalendern, observera växterna. Friska, aktivt växande skott är generellt bättre kandidater för subkultivering än svag eller stressad vävnad.
Stadie 3: Rotning
Ett skott som producerats under multiplikationen är inte automatiskt redo att lämna vävnadsodlingen. Det behöver vanligtvis ett fungerande rotsystem. Under rotningen ändras hormonbalansen för att uppmuntra rotbildning och längdtillväxt. Auxiner som IBA används ofta för detta ändamål. Målet är inte längre att skapa så många skott som möjligt, utan istället att producera en stark, enskild småplanta som kan överleva utanför odlingskärlet.
Varför inte använda ett medium för allt?
Ett medium som ger utmärkt multiplikation kan hämma rotning. Ett medium optimerat för rotning kan ge mycket liten skottmultiplikation. Växtutvecklingen ändras beroende på näringskoncentration, sockerhalt och hormonbalans. Genom att använda separata stadier kan odlaren kontrollera dessa utvecklingssignaler.
Ett användbart sätt att se på systemet är:
Etablering → Överleva och bli ren
Multiplikation → Producera fler skott
Rotning → Bygga en självständig planta
Acklimatisering → Anpassa sig till normala odlingsförhållanden
Denna sekvens är en av de grundläggande idéerna bakom mikroförökning.