Varför vävnadsodlade plantor blir bruna, glasartade eller slutar växa
Alla problem med vävnadskulturer beror inte på kontaminering. Växter kan vara helt sterila men ändå växa dåligt. Brunfärgning, glasartat vävnadsväxt, gula blad och avstannad tillväxt är alla vanliga symptom som kan ge ledtrådar om vad som händer i odlingskärlet.
Brunfärgning
Nyskuren växtvävnad kan frigöra fenolämnen. När dessa ämnen oxiderar kan både explanten och det omgivande odlingsmediet bli brunt. Vissa arter producerar mycket mer fenolmaterial än andra. Kraftig oxidation kan skada vävnaden och till slut döda explanten.
Brunfärgningen kan förvärras efter:
- kraftig tillskärning
- kraftig sterilisering
- vävnadsskada
- långvarig stress
Att minska onödig vävnadsskada och överföra drabbade explanter till färskt medium kan ibland hjälpa.
Hyperhydricitet
Hyperhydricitet beskrivs ofta som glasartad, vattenrik eller genomskinlig tillväxt. Drabbade skott kan se svullna och ovanligt mjuka ut. Bladen kan bli tjocka, spröda eller missbildade.
Hyperhydricitet kan vara förknippat med:
- för höga halter av cytokinin
- dålig gasutväxling
- mycket hög luftfuktighet
- för blött medium
- låg agarhalt
- vissa näringsvillkor
Att minska exponeringen för cytokinin eller förbättra odlingens fysiska förhållanden kan ibland förbättra den senare tillväxten.
Gula blad
Gulnad kan tyda på flera olika problem. Möjliga orsaker inkluderar:
- obalans i näringsämnen
- försämrad mediakvalitet
- för hög saltkoncentration
- olämpligt pH
- åldrande blad
- ljusstress
- dålig rotfunktion
Mönstret för gulnad är ofta mer informativt än symptomet i sig.
Skott som förblir mycket små
Höga multiplikationstal är inte alltid önskvärda. Kraftig exponering för cytokinin kan ge många små skott som inte förlängs. Om skotten förblir extremt kompakta kan en minskning av cytokininhalten vid nästa subkultur hjälpa dem att utvecklas mer normalt.
Odlingar som slutar växa
Tillväxten kan avstanna när mediet blir uttömt eller när växten har stått i samma kärl för länge. Andra möjligheter inkluderar:
- olämplig hormonbalans
- olämplig koncentration av basalsalter
- otillräckligt ljus
- låg temperatur
- fysiologisk stress
- latent kontaminering
En färsk subkultur kan ofta hjälpa till att avgöra om problemet ligger i det gamla mediet.
Ett symptom kan ha flera orsaker
Felsökning av vävnadskulturer är sällan så enkelt som:
”Brun = ett specifikt problem.”
Titta istället på flera variabler tillsammans.
Fråga:
- När började symptomet?
- Hände det direkt efter inokulering?
- Är alla odlingar drabbade?
- Ändrades något i den senaste batchen?
- Är mediet detsamma?
- Är temperaturen stabil?
- Växer andra odlingar normalt?
Bra felsökning är i grunden kontrollerade experiment. Gör en ändring, observera reaktionen och för anteckningar.
