Varför vävnadsodlade plantor blir bruna, glasartade eller slutar växa
Alla problem vid vävnadsodling beror inte på kontaminering. Växter kan förbli helt sterila men ändå växa dåligt. Brunfärgning, glasartad vävnad, gula blad och avstannad tillväxt är alla vanliga symptom som kan ge ledtrådar om vad som händer inuti odlingskärlet.
Brunfärgning
Nyklippt växtvävnad kan frigöra fenolföreningar. När dessa föreningar oxiderar kan explantatet och det omgivande mediet bli brunt. Vissa arter producerar mycket mer fenolmaterial än andra. Kraftig oxidation kan skada vävnaden och så småningom döda explantatet.
Brunfärgning kan förvärras efter:
- aggressiv klippning
- stark sterilisering
- vävnadsskada
- långvarig stress
Att minska onödiga vävnadsskador och föra över påverkade explantat till färskt medium kan ibland hjälpa.
Hyperhydricitet
Hyperhydricitet beskrivs ofta som glasartad, vattnig eller genomskinlig tillväxt. Påverkade skott kan se svullna och ovanligt mjuka ut. Blad kan bli tjocka, sköra eller missbildade.
Hyperhydricitet kan vara kopplat till:
- överskott av cytokinin
- dåligt gasutbyte
- mycket hög luftfuktighet
- alltför vått medium
- låg agarkoncentration
- vissa näringsförhållanden
Att minska exponeringen för cytokinin eller förbättra de fysiska förhållandena i odlingen kan ibland förbättra den senare tillväxten.
Gula blad
Gula blad kan tyda på flera olika problem. Möjliga orsaker inkluderar:
- näringsobalans
- försämrad mediekvalitet
- för hög saltkoncentration
- olämpligt pH-värde
- åldrande blad
- ljusstress
- dålig rotfunktion
Mönstret för gulnandet är ofta mer informativt än själva symptomet i sig.
Skott som förblir mycket små
Höga multiplikationstal är inte alltid önskvärda. Stark exponering för cytokinin kan ge många små skott som inte sträcker på sig. Om skotten förblir extremt kompakta kan en minskning av cytokininkoncentrationen vid nästa subkultivering hjälpa dem att utvecklas mer normalt.
Kulturer som slutar växa
Tillväxten kan sakta ner när mediet blir utarmat eller plantan har stått i samma kärl för länge. Andra möjligheter inkluderar:
- olämplig hormonbalans
- olämplig koncentration av bassalter
- otillräckligt ljus
- låg temperatur
- fysiologisk stress
- latent kontaminering
En färsk subkultivering kan ofta hjälpa till att avgöra om problemet ligger i det gamla mediet.
Ett symptom kan ha flera orsaker
Felsökning vid vävnadsodling är sällan så enkelt som:
"Brunt = ett specifikt problem."
Titta istället på flera variabler samtidigt.
Fråga:
- När började symptomet?
- Hände det omedelbart efter inokulering?
- Är varje kultur påverkad?
- Ändrades något i den senaste satsen?
- Är mediet detsamma?
- Är temperaturen stabil?
- Växer andra kulturer normalt?
Bra felsökning är i grunden kontrollerad experimentering.
Gör en förändring, observera responsen och för protokoll.