Hvorfor vevskulturplanter blir brune, glassaktige eller slutter å vokse
Ikke alle problemer med vevskultur skyldes kontaminering. Plantene kan være helt sterile og likevel ha dårlig vekst. Brunfarging, glassaktig vev, gule blader og stanset vekst er alle vanlige symptomer som kan gi ledetråder til hva som skjer i kulturbeholderen.
Brunfarging
Nylig skåret plantevev kan frigjøre fenolforbindelser. Når disse forbindelsene oksiderer, kan eksplantatet og det omkringliggende mediet bli brunt. Noen arter produserer mye mer fenolmateriale enn andre. Kraftig oksidering kan skade vevet og til slutt drepe eksplantatet.
Brunfargingen kan bli verre etter:
- kraftig kutting
- kraftig sterilisering
- vevsskade
- langvarig stress
Det kan noen ganger hjelpe å redusere unødvendig vevsskade og overføre de berørte eksplantatene til friskt medium.
Hyperhydrisitet
Hyperhydrisitet beskrives ofte som glassaktig, vannaktig eller gjennomsiktig vekst. Berørte skudd kan se hovne og uvanlig myke ut. Bladene kan bli tykke, sprø eller misdannede.
Hyperhydrisitet kan være forbundet med:
- for mye cytokinin
- dårlig gassutveksling
- svært høy luftfuktighet
- for vått medium
- lav agar konsentrasjon
- visse næringsforhold
Det kan noen ganger hjelpe å redusere eksponeringen for cytokinin eller forbedre de fysiske forholdene i kulturen for å fremme bedre vekst senere.
Gule blader
Gulning kan tyde på flere ulike problemer. Mulige årsaker inkluderer:
- ubalanse i næringsstoffene
- synkende kvalitet på mediet
- for høy saltkonsentrasjon
- uhensiktsmessig pH
- aldrende blader
- lysstress
- dårlig rotfunksjon
Mønsteret for gulningen er ofte mer informativt enn symptomet alene.
Skudd som forblir svært små
Høye multiplikasjonsrater er ikke alltid ønskelig. Kraftig eksponering for cytokinin kan føre til mange små skudd som ikke klarer å strekke seg. Hvis skuddene forblir svært kompakte, kan det hjelpe å redusere cytokininkonsentrasjonen under neste subkultur for at de skal utvikle seg mer normalt.
Kulturer som slutter å vokse
Veksten kan avta når mediet blir utbrukt eller når planten har stått i samme beholder for lenge. Andre muligheter inkluderer:
- uhensiktsmessig hormonbalanse
- uhensiktsmessig basal saltkonsentrasjon
- for lite lys
- lav temperatur
- fysiologisk stress
- latent kontaminering
En frisk subkultur kan ofte hjelpe med å fastslå om problemet ligger i det gamle mediet.
Ett symptom kan ha flere årsaker
Feilsøking i vevskultur er sjelden så enkelt som:
«Brun = ett spesifikt problem.»
Se heller på flere variabler sammen.
Spør:
- Når begynte symptomet?
- Skjedde det umiddelbart etter inokulering?
- Er alle kulturer berørt?
- Ble noe endret i den siste batchen?
- Er mediet det samme?
- Er temperaturen stabil?
- Vokser de andre kulturene normalt?
God feilsøking er i bunn og grunn kontrollerte eksperimenter. Gjør én endring, observer reaksjonen og før oversikt.
