Por qué las plantas de cultivo de tejidos se vuelven marrones, vítreas o dejan de crecer
No todos los problemas del cultivo de tejidos son por contaminación. Las plantas pueden permanecer perfectamente estériles y, aun así, crecer mal. El pardeamiento, el tejido vítreo, las hojas amarillas y el crecimiento estancado son síntomas comunes que pueden dar pistas sobre lo que está ocurriendo dentro del recipiente de cultivo.
Pardeamiento
El tejido vegetal recién cortado puede liberar compuestos fenólicos. Cuando estos compuestos se oxidan, el explante y el medio circundante pueden tornarse marrones. Algunas especies producen mucho más material fenólico que otras. Una oxidación severa puede dañar el tejido y, con el tiempo, matar el explante.
El pardeamiento puede empeorar después de:
- cortes agresivos
- una esterilización intensa
- lesiones en el tejido
- estrés prolongado
A veces, reducir el daño innecesario al tejido y transferir los explantes afectados a un medio fresco puede ayudar.
Hiperhidricidad
La hiperhidricidad se describe a menudo como un crecimiento vítreo, acuoso o translúcido. Los brotes afectados pueden verse hinchados y inusualmente blandos. Las hojas pueden volverse gruesas, quebradizas o malformadas.
La hiperhidricidad puede estar asociada con:
- exceso de citoquinina
- intercambio deficiente de gases
- humedad muy elevada
- medio demasiado húmedo
- baja concentración de agar
- ciertas condiciones nutricionales
A veces, reducir la exposición a la citoquinina o mejorar las condiciones físicas del cultivo puede favorecer el crecimiento posterior.
Hojas amarillas
El amarillamiento puede indicar varios problemas diferentes. Las posibles causas incluyen:
- desequilibrio nutricional
- deterioro de la calidad del medio
- concentración excesiva de sales
- pH inadecuado
- envejecimiento de las hojas
- estrés lumínico
- deficiente función radicular
El patrón de amarillamiento suele ser más revelador que el síntoma por sí solo.
Brotes que permanecen muy pequeños
Las altas tasas de multiplicación no siempre son deseables. Una exposición intensa a la citoquinina puede producir muchos brotes diminutos que no logran elongarse. Si los brotes permanecen extremadamente compactos, reducir la concentración de citoquinina durante la siguiente subcultura puede ayudar a que se desarrollen con mayor normalidad.
Cultivos que dejan de crecer
El crecimiento puede ralentizarse cuando el medio se agota o la planta ha permanecido demasiado tiempo en el mismo recipiente. Otras posibilidades incluyen:
- equilibrio hormonal inadecuado
- concentración inadecuada de sales basales
- luz insuficiente
- baja temperatura
- estrés fisiológico
- contaminación latente
A menudo, una subcultura fresca puede ayudar a determinar si el problema reside en el medio antiguo.
Un síntoma puede tener varias causas
La resolución de problemas en el cultivo de tejidos rara vez es tan sencilla como:
«Marrón = un problema específico».
En su lugar, analice varias variables en conjunto.
Pregúntese:
- ¿Cuándo comenzó el síntoma?
- ¿Ocurrió inmediatamente después de la inoculación?
- ¿Se ven afectados todos los cultivos?
- ¿Se cambió algo en el último lote?
- ¿Es el mismo medio?
- ¿Es estable la temperatura?
- ¿Están creciendo normalmente los demás cultivos?
Resolver bien los problemas consiste, en esencia, en realizar experimentos controlados. Haga un solo cambio, observe la respuesta y lleve un registro.
